Biyofilm nasıl tespit edilir?

Biyofilm, mikroorganizmaların bir araya gelerek oluşturduğu, hücre dışı polimerik maddelerle kaplı yapılar olarak tanımlanır. Bu yapılar, çeşitli ortamlarda bulunabilir ve sağlık alanında önemli sorunlara yol açabilir. Biyofilm tespiti, bu tür yapıları belirlemek ve kontrol altına almak için kritik öneme sahiptir. Çeşitli yöntemler kullanılarak biyofilm varlığı ve yapısı detaylı bir şekilde incelenebilir.

Biyofilm tespit yöntemleri şunlardır:

Doku Kültürü Plakası Yöntemi: Bakteriler, 1% glikoz içeren triptikaz soya besi yerine inokule edilir ve 96 kuyucuklu plakada 37°C'de 24-48 saat inkübe edilir. Daha sonra planktonik bakteriler dökülür ve kuyular yıkanır, %0, 1 kristal viyole boya ile doldurulur ve fazla boya su ile yıkanır. Kalan boya %95 etanol ile çözündürülür ve optik yoğunluk (OD) 620 nm'de ölçülür.

Kongo Kırmızılı Agar Yöntemi: Bakteriler, kongo kırmızısı içeren besiyerine ekilir ve belirli bir süre inkübe edilir. Biyofilm oluşumu, kuyucukların iç yüzeyinde renkli bir oluşum olarak gözlemlenir.

Fiber-Optik Sensör Yöntemi: Kızılötesi ışınların penetrasyonundaki değişim ölçülür.

Gerçek Zamanlı Hücre Analizi Yöntemi: Elektrik akımına dirençteki değişim saptanır.

Luminisan Konjue Oligotiyofen Yöntemi: Biyofilm matriks komponentleri tespit edilir.

Ayrıca, floresan mikroskobisi, konfokal lazer tarama mikroskobisi ve elektron mikroskobisi gibi yöntemler de biyofilm tespitinde kullanılabilir.

1. Doku Kültürü Plakası Yöntemi: Bakteriler, 1% glikoz içeren triptikaz soya besi yerine inokule edilir ve 96 kuyucuklu plakada 37°C'de 24-48 saat inkübe edilir. Daha sonra planktonik bakteriler dökülür ve kuyular yıkanır, %0, 1 kristal viyole boya ile doldurulur ve fazla boya su ile yıkanır. Kalan boya %95 etanol ile çözündürülür ve optik yoğunluk (OD) 620 nm'de ölçülür.
2. Kongo Kırmızılı Agar Yöntemi: Bakteriler, kongo kırmızısı içeren besiyerine ekilir ve belirli bir süre inkübe edilir. Biyofilm oluşumu, kuyucukların iç yüzeyinde renkli bir oluşum olarak gözlemlenir.
3. Fiber-Optik Sensör Yöntemi: Kızılötesi ışınların penetrasyonundaki değişim ölçülür.
4. Gerçek Zamanlı Hücre Analizi Yöntemi: Elektrik akımına dirençteki değişim saptanır.
5. Luminisan Konjue Oligotiyofen Yöntemi: Biyofilm matriks komponentleri tespit edilir.